رزفایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

رزفایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

تحقیق درباره ژنتیک مولکولی و ژن درمانی در بیماریهای میتوکندریایی

اختصاصی از رزفایل تحقیق درباره ژنتیک مولکولی و ژن درمانی در بیماریهای میتوکندریایی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 23

 

مجله دانشکده پزشکی

دانشگاه علوم پزشکی تهران

سال 63، شماره 10، صفحات 791 تا 813 (1384)

ژنتیک مولکولی و ژن درمانی در بیماریهای میتوکندریایی

(مقاله مروری)

چکیده

پس از کشف اولین بیماری مرتبط با اختلال در ژنوم میتوکندری در اواخر سال های 1980 تاکنون، شمـــــــار بیماری های مرتبط با نقص در ژنوم میتوکندریایی رو به افزایش است. با وجود پیشرفت های بی شمار در فهم اختلالات میتوکندریایی چه در سطح ژنتیکی و چه در سطح بیوشیمایی، هنوز درمان رضایت بخشی برای اکثر این بیماران وجود ندارد. بخش عمده ای از این مسئله به این دلیل می باشد که اکثریت این بیماران دارای نقص در زنجیره تنفسی می باشند که مسئول تولید انرژی می باشد و تاکنون هیچ راه فرعی برای رساندن انرژی به این افراد ازطریق مصنوعی شناخته نشده، درنتیجه اکثر توجه ها به سوی ژن درمانی این بیماری ها معطوف بوده است. در حال حاضر، سه راهکار برای ژن درمانی بیماری های میتوکندریایی وجود دارد: مهار تکثیر ژنوم معیوب با استفاده از فناورری آنتی سنس، معرفی ژن سالم به میتوکندری و معرفی ژن سالم به هسته با هدف انتقال محصول پروتئینی ژن سالم به میتوکندری. هر گونه موفقیتی در ژن درمانی میتوکندری بستگی به دردست بودن ناقالین مناسب اختصاصی برای میتوکندری می باشد. در مقاله مروری حاضر با استفاده از منابع جدید و معتبر فراوان به معرفی روش های جدید ژن درمانی و سیستمهای موجود برای رها شدن اختصاصی ژن به میتوکندری پرداخته شده است. ناقلین اختصاصی میتوکندری باید دارای دو ویژگی باشند: باید ژن موردنظر را به طور اختصاصی درمیتوکندری رها کنند وازطرفی نباید آن را درطول آندوسیتوز رها سازند. مدت های طولانی است که می دانیم ترکیبات آمفی فیل دارای مرکز باردار کاتیونی چون ردامین 123و دکوالینیوم دارای تجمع داخل میتوکندریایی می باشند. این ترکیبات دارای چربی دوستی کافی همراه با مرکز باردار مثبت هستند. خاصیتی که موجب کاهش تغییرات انرژی آزاد به هنگام انتقال از محیط آبی به محیط هیدروفوب می شود و به هنگام عبور از غشاء میتوکندری به منظور تجمع در میتوکندری مورد نیاز می باشد. اخیرا ناقلی معرفی شده است که از دکوالینیوم ساخته شده و به همین نام نیز نامیده می شود. مطالعات نشان داده است که این ناقل به ژن موردنظر متصل شده و آن را از حمله نوکلئازها محافظت می کند. با توجه به ویژگی ذاتی این ماده برای تجمع در میتوکندری به نظـــــر می رسد که این ناقل می تواند به منظور رهاسازی اختصاصی ژن ها در میتوکندری استفاده شود.

مقدمه

میتوکندری نخستین بار، حدود یکصد سال پیش توسط Altman مشاهده شد. او آن را اندامگان ابتدایی ( elementary organism) نامید و میتوکندری را اندامگانی بازندگی آزاد که درسلول قرار گرفته است توصیف کرد. جالب توجه است که اغلب شواهد امروزی ، این نظریه را تقویـــت کرده و تأکید دارد که میتوکندری از باکتری های قدیمی مشتق شده است.

میتوکندری نخستین اندامگان سلولی است که ارتباط آن با بیماری های انسانی مشخص شد. بدین ترتیب که Luft و همکاران در سال 1962 شواهدی مبنی بر بدکاری میتوکندری در بیماران دارای متابولیسم بالا ارایه کردند. درپی آن، گزارش های دیگری مبنی برنقص در زنجیره تنفسی و اختلالات ریخت شناسی در بیماران بــا شکل های مختلف سندرم انسفالومیوپاتی ، آن را تأیید کرد. در 1963، Nass و Nass با کشـــــــف غیر منتظره خود، نشان دادند که میتوکندری دارای DNA ویژه به خود (mitochondrial DNA=mtDNA ) می باشد. در سال 1981، توالی بازی کامـل mtDNA انسان و موش گزارش شد. هر چند که پایه ژنتیکی اختلالات میتوکندریایی تاسال 1988 مبهم بود. دراین سال بود که نخستین جهش بیماریزا در میتوکندری گزارش گردید(1).

کشف مذکور موجب شد که پژوهشها بروی بیماری های میتوکندریایی متمرکز شود و شمــار بیماری هایی که درارتباط با نقص در mtDNA هستند به نحو قابل توجهی – به ویژه در خلال دهة اخیر- افزایش یابد. تاسال 1999 بیش از 50 جهش مختلف با جابجایی باز و بیش از 100 بازآرایی مختلف که موجب بیماری های مختلف درانسان می شود در mtDNA مشخص گردیده است(2). این یافته ها، موجب ایجاد یک انقلاب بزرگ وگشایش حوزه ای جدید در پزشکی به نام پزشکی میتوکندری (Mitochondrial Medicine ) شده است(2). پیشرفت های اخیر در زمینه استفاده از الگو های حیوانی، با آسان کردن مطالعات مولکولی، موجب گسترش اطلاعات و در نتیجه ایجاد داروهای جدید و نیز استراتژی های درمانی نو برای بیماری های میتوکندریایی گردیده است(3).

علی رغم پیشرفت در فهم نقص هایmtDNA در سطح بیوشیمیایی و ژنتیکی، هنوز درمان رضایت بخشی برای توده وسیعی از بیماران در دسترس نیست. بخش عمده این فقدان، به دلیل آن است که تقریبا" تمام نقص های mtDNA به نحوی با متابولیسم اکسیداتیو و تولید ATP همراه هستند و درمان آن توسط یک مسیر فرعی و یا از شیوه وارد کردن این متابولیت ( ATP) به بدن در حال حاضر، غیر ممکن به نظر می رسد. این مسئله، درمان های بیوشیمیایی رابرای بیماران محدود کرده و موجب شده است که دانشمندان به ژن درمانی روی آورند. ژن درمانی در میتوکندری، البته هنوز به شکل نظری و در حد آزمایش های اولیه در الگو های حیوانی مطرح است. هر امکانی برای تعویض ژن به استفاده از ناقلین (vectors ) مناسب انتقال دهنده وابسته می باشد که ژن مورد نظر را وارد اندامگان هدف (میتوکندری) کند(3).

اگر چه در سالهای اخیر پیشرفت های بسیاری در این زمینه به دست آمده است، اما ناقلین جهت دار هنوز در دست بررسی و آزمایش هستند.

دراین مقاله با استفاده از ده ها منبع معتبرو جدید، به طور خلاصه به معرفی میتوکندری، خصوصیات آن، بیماری ها و روش های درمانی موجود برای آن که تا به امروز وجود دارد پرداخته شده اســــت. به علاوه، روشهای ژن درمانی موجود، ویژگی ها، مزایا و معایب هر روش توضیح داده شده است.

ویژگیهای میتوکندری

نیای میتوکندری احتمالا، باکتری های قدیمی بوده اند که در شکل انگل درون سلول یوکاریوت های اولیه زندگی می کرده اند. برخی از رخدادهای صورت گرفته درخلال 5/1 بیلیون سال، موجب حذف یا انتقال اغلب ژنوم باکتری به هسته و تغییر انگل درون سلولی به یک اندامگان کامل وابسته به هسته گردیده است (2). هسته، 80% ژنهای زیر واحدهای مسیر فسفریلاسیون اکسیداتیو و تمام ژنهای لازم برای متابولیسم های حد واسط میتوکندری مانند چرخه کربس، اکسیداسیون اسیدهای چرب ، متابولیسم اسیدهای آمینه، زیست زایی (biogenesis ) ویتامین ها و پروتئین های لازم برای میتوکندری را داراســت (4) . در نتیجه چون منشاء آن یک همزیست قدیمی است ژنهای آن با ژنهای هسته، تفاوت هایی در فرایندهایی مانند همانندسازی، رونویسی و ترجمه دارا می باشد. ازنظر کلید های رمز ژنتیکی و عوامل لازم برای اعمال مختلف بین میتوکندری با هسته تفاوتهایی وجوددارد. این واقعیت موجب می شودکه سنتزپروتئین آن به آنتی بیوتیک هایی که این عمل را در پروکاریوت ها مهار می کند، ونیز به آنتی بیوتیک هایی که ترجمه سیتوزولی یوکاریوت ها را مهار می کند حساس باشد(5).

میتوکندری، یک اندامگان کوچک درون سیتوپلاسمی با اندازه 1-5/0 میکرومتر است که در سیتوپلاسم سلول های هسته دار یوکاریوتی یافت می شود و دارایDNA مربوط به خـــود (mtDNA) می باشد ( 1 ).

میتوکندری ها به طور قابل توجهی کشایند (elastic) و متحرک بوده و شکل آن قابل تغییر است. نیز، قابلیت با هم یکی شدن و دوباره از هم جدا شدن را دارند. حرکت آنها توسط میکروتوبول ها (microtubules ) تنظیم می شود و این امر موجب توزیع میتوکندری به سلول های متفاوت می گردد. همچنین، دارای دو غشاء (درونی و بیرونی) وماتریکس بین دوغشاء و ماتریکس درونی می باشند. غشاء خارجی به مولکول های کوچک تاKD 10نفوذ پذیر است و درنتیجه تولید یک فضای بین غشائی می کند که از نظر شیمیایی (به ویژه مولکول های کوچک) معادل سیتوزول می باشد. غشاء درونی تنها بــه 2O و 2Co نفوذپذیر است. نفوذناپذیری امری مهم و حیاتی است که موجب حفظ شیب پروتون تولیدی به هنگام انتقال الکترون درطول زنجیره تنفسی می گردد. شیب پروتون برای تولیدATP لازم و ضروری است. تولید ATP و انرژی سلولی مهمترین واصلی ترین نقش میتوکندری محسـوب می شود( 1 ).

غشاء درونی دارای کریستاها و شیارهایی است که موجب افزایش سطح غشا برای انجام واکنش های زنجیره تنفسی می شود. این کریستاها می تواند ساختار لوله ای ساده یا پیچیده ( صفحه ای، مجرایی) را نشان دهند( 6 ). غشاء درونی دارای مجموعه یا کمپلکس های زنجیره تنفسی می باشد و در نتیجه حجم بالایی از پروتئین های غشائی غیرمعمول را داراست. به علاوه دارای انواع پروتئین های انتقال دهنــــده (ناقل) می باشد. ماتریکس یا فضای درونی شامل mtDNA ، ریبوزوم و پروتئین های لازم برای همانندسازی، رونویسی، ترجمه mtDNAونیز آنزیم ها و متابولیت های لازم برای دیگرفعالیت های میتوکندری (از جمله چرخه کربس، بتااکسیداسیون اسید های چرب، متابولیسم اسیدهای آمینه، زیست زایی ویتامین ها و ریبوزوم)، است. مواد غذایی درون ماتریکس اکسید شده و نتیجه آن احیا کمک عامل ها و انتقال الکترون ها به مجموعه های آنزیمی در غشاء درونی می باشد. خارج شدن الکترون توســط سه عدد از این مجموعه ها، ایجاد شیب پروتون و در نتیجه تولید ATP می کند (1 ).

از آنجا که میتوکندری مرکز مهم متابولیسم سلولی است و در بسیاری از مسیرهای متابولیکی درگیر است، معمولا" بخش وسیعی از حجم سلول را اشغال می کند. سلول های انسانی بسته به نیاز خود به انرژی، از چند تا چندین هزار میتوکندری رادارا می باشند. ازدیاد میتوکندری توسط تقسیم دوتایی است. در نتیجه هر میتوکندری از میتوکندری پیشین حاصل می شود( 4) .

ژنتیک میتوکندری : A Genetic Pandora’s Box

در اساطیرآمده است که مردی غول پیکر به نام Prometheus به دلیل دزدیدن آتش از خدا، محکوم به زندگی در صخره های قفقاز شد. خداوند برای تنبیه او بشر فانی یعنی زنی زیبا به نام Pandora را برای او فرستاد که تنها ضعف او کنجکاوی او بود. جعبه ای به رسم امانت به Pandora سپرده شده بود و اوقسم یادکرده بود که هرگز آن را باز نکند . اما به دلیل کنجکاوی، پاندورا آن جعبه را باز کرد و به محض بازشدن جعبه، تمام شیاطین از جعبه بیرون آمدند و در اطراف جهان پخش شدند. اما مناسبت مقایسةmtDNA به جعبه پاندورا تنها به دلیل بیماریهای فراوانی نیست که مسبب آن DNA حلقه ای میتوکندری می باشد، بلکه بدان جهت است که جعبه پاندورا توسط یک زن آورده شد و mtDNA نیز توسط مادر به فرزند انتقال می یابد. از طرفی Prometheus، به بشرآتش بیرونی (منبع روشنایی و گرما) را هدیه کرد در حالی که پاندورا آتش درونی (شیاطین و وسوسه های آنها ) را ارایه کرد و چنانچه می دانیم میتوکندری منبع انرژی درونی سلول می باشد( 3 ).

هرمیتوکندری دارای 2 تا 10 نسخه از DNA است. درنتیجه به طورمعمول هرسلول دارای 104 – 103 نسخه ازmtDNA می باشد. اندازه mtDNA در پستانداران بین 16 تا 18 کیلوباز متغیر است. mtDNAانسان، مولکول حلقوی دو رشته به اندازه bp 16569 می باشد. فاقد اینترون است و ژنهای آن ) شامل 37 عدد) بسیار فشرده و به هم چسبیده بوده یا اینکه تنها توسط چند نوکلئوتید از هم جدا شده اند. 2 ژن آن رمز کننده rRNA (s rRNA16s rRNA, 12) ، 22 ژن رمز کننده tRNA و 13 ژن آن رمز کننده پلی پپتیدهایی می باشد که همگی از ترکیبات زنجیرة تنفسی (فسفریلاسیون اکسیداتیو) هستند. زنجیره تنفسی دارای 5 مجموعه یا کمپلکس آنزیمی است که این مجموعه ها شامل 100 زیر واحد پروتئینی متفاوت است.

زیر واحدهایی که توسط mtDNA رمزدهی می شود، مشتمل بر موارد زیر است:

الف) 7 زیر واحد از 39 زیرواحد مجموعة یک به نام NADH دهیدروژنازیوبی کینون اکسید وردوکتاز

(NADH dehydrogenase-ubiquinone oxidoreductase ( : ND1, ND2 , ND3, ND4L , ND5, ND6 , ND4

ب) 1 زیر واحد از 10 زیرواحد مجموعة 3 به نام یوبی کینون سیتوکروم C اکسیدورودوکتاز

(ubiquinone-cytochrome C oxidoreductase) : سیتو کرومb یا Cytb

ج) 3 زیرواحدد از 13 زیرواحد مجموعة 4 تحت عنوان سیتوکروم C اکسیداز یا COX

(cytochrome C oxidase) : CoI , CoII,CoIII

د) 2 زیرواحد از 12 زیرواحد مجموعة 5 به نام ATP سنتتاز ( ATP synthetase) : ATP ase 6 وATPase 8

شایان ذکر است که تمام چهار زیرواحد مجموعة 2 با عنوان سوکسینات دهیدروژنازیوبی کینون اکسیدوردوکتاز(succinate dehydrogenase-ubiquinone oxidoreductase)، انحصارا توسط DNAی هسته ( nDNA nuclear DNA=) رمزدهی می شود ( 4) .

از آنجاکه 13 ژن، پلی پپتیدهای زنجیره تنفسی و 24ژن دیگر نیز RNA ها را که در سنتز پروتئین نقش دارند، رمزدهی می کنند، جهش و از بین رفتن فعالیت هر بخشی از mtDNA موجب می شود که سلول بیش از پیش ظرفیت سنتز ATP خود را ازدست بدهد (1 ).

باقیمانده زیرواحدهای این مجموعه ها توسط nDNA رمزدهی شده و در سیتوپلاسم ترجمه می گردند و از آنجا وارد میتوکندری می شوند و با زیر واحدهایی که توسط mtDNA رمزدهی می شود مجتمع می شوند. پروتئین های رمز شده توسط هسته، دارای پپتید یا علامت راهنما با بار مثبت در انتهای آمین خود می باشند که موجب هدایت آنها توسط این علامت به سوی میتوکندری گردیده و سپس به گیرنده مربوط به خود متصل شده و ازبین غشاء عبور می کنند. این پیتید راهنما پس از انتقال پروتئین به میتوکندری، توسط پروتئازها جدا می شود. به طور کلی حدود 1000 پروتئین میتوکندریایی متفاوت توسط ژنوم هسته ای رمزدهی می گردد. بنابراین جهش در ژنهای هسته ای می تواند بسیاری از اعمال میتوکندری را مختل کند( 5 ).

دو رشتة mtDNA از نظر محتوای بازی باهم متفاوت هستند. رشته سنگین (heavy=H) بیشتر دارای G و رشتة سبک (light=L) بیشتر د ارای C می باشد. عمل رشتة H الگو برداری s rRNA16 و s12 و 12 پلی پپتید و 14 عدد tRNA است. رشته L، الگوبرداری پلی پپتیدND6 و 8 عددtRNA را برعهده دارد. هررشته دارای یک نقطه شروع همانندسازی مربوط به خود است که فاصله دو منطقه همانندسازی (مربوط به دورشته) به اندازه دوسوم ژنوم می باشد. از نظر کنترلی، نقطه شروع همانندسازی رشته H، در منطقه مهمی قرار گرفته است که به آن حلقة D (Displacement ) گویند و تنها ناحیة غیر رمزدار در mtDNA است. ناحیة حلقة D شامل پروموتر(promoter=P) برای رونویسی هر دورشته mtDNA می باشد. پروموتر مربوط به رشتهH از نوکلئوتید567-547 وپروموتر مربوط به رشته L، ازنوکلئوتید 445-392 می باشد. همچنین، سه توالی حفظ شده 363-346:,CSBIIT 315-299 CSBII:و 235-213: CSBIو توالی TAS ( Termination Associated Sequence) یا 16172-16147 نیز دراین ناحیه قرار گرفته است. حلقة D یک منطقه سه رشته ای را شکل می دهد که رشته سوم یک قطعه جدیدH به نام Vs DNA می باشد. Vs DNA با استفاده از پرایمرRNA، از منطقه PL رونویسی شده وتانزدیک CSBII پیش رفته و سپس توسط RNA ase میتوکندریایی به نامMRP، که عمل آن پردازش RNA است، شکافته می شود. سنتز Vs DNA ازCSBII شروع می شود و در TAS ختم می گردد. اندازه آن np 700 است . سنتز رشته H از VsDNA شروع می شود ودرجهت عقربه ساعت ادامه یافته و زمانی که دوسوم ژنوم را طی کرد به منشاء همانندسازی رشته L ( 5798-5721OL, np ) می رسد. سنتز رشتهL نیز با یک پریماز ویژه که s rRNA8/5 سیتوزولی است شروع می شود و جهت سنتز آن در خلاف جهت رشته H و در طول رشته H آزاد شده می باشد. بنابراین همانندسازی دوجهته اما غیر همزمان است. از آنجا کهmtDNA ابرمارپیچ (super-coiled ) است، همانند سازی و رونویسی می تواند توسط برومیداتیدیوم (ethidium bromide ) مهار شود .

ژنوم میتوکندری ، فاقد اینترون بوده و بسیار فشرده می باشد و اغلب mRNA های آن فاقد توالی های ترجمه نشدنی انتهای ´5 و ´3 می باشند . درابتدای mRNA ها ، کلید رمز آغاز کننده ودرانتهای آنها کلید رمز ایست قرار دارد و پایانة پلی A پس از رونویسی به آنها اضافه می شود. رونوشت رشته H، تولید مقادیر زیادی رونوشت rRNA می کند.

مانند باکتری ها، سنتز پروتئین در میتوکندری، بااسیدآمینه فرمیل متیونین شروع می شود. عوامل طویل کننده آن مشابه باکتری هاست و به مهار کننده های ریبوزوم باکتری چون کلرامفنیکل (chloramphenicole=CAP ) حساس می باشد. شایان ذکر است که میتوکندری با دیگر اندامگان ها در داشتن کلیدهای رمز ژنتیکی متفاوت است، به طور مثال درمیتوکندری کلیدهای رمز ایست UGA و UGG برای تریپتوفان و کلیدهای رمز مربوط به آرژنین یعنی AGA و AGG برای ختم زنجیره استفاده می شود. چون اغلبmRNAهای میتوکندریایی دارای شمار زیادی از کلید UGA هستند، از این رو در سیتوپلاسم نمی توانند ترجمه شوند، در نتیجه این تفاوت در کلیدهای رمز ژنتیکی موجب می شود که تنها در میتوکندری ترجمه گردند (4 ).

میتوکندری دارای DNA پلیمرازگاما (ﻻ) ونیز عوامل رونویسی ویژه مانند mt TFA (نام دیگرآن Tfam ) می باشد که این دو پروتئین توسط هسته رمزدهی شده و سپس وارد میتوکندری می شوند. میتوکندری، همچنین واجد دیگر پروتئین های لازم برای همانند سازی مانند DNA پریماز، توپوایزومراز نوع 1و2، هلیکاز، پروتئین های متصل شونده به DNA تک رشته ای، DNA وRNA اندونوکلئازها و نوکلئوزید کینازها می باشد( 4 ).

تفاوت ژنتیک میتوکندریایی باژنتیک مندلی:

ژنتیک میتوکندریایی با ژنتیک مندلی از جهات متعددی ، به ویژه موارد زیر متفاوت است:

توارث مادری:

تخم دارای صد هزار mtDNA است در حالی که اسپرم تنها چندصد عدد دارد. به هنگام لقاح، تمام میتوکندری تخم و در نتیجه mtDNA از طریق اووسیت دریافت می شود، بنابراین مادری که دارای جهش در mtDNA می باشد آن را به تمام


دانلود با لینک مستقیم


تحقیق درباره ژنتیک مولکولی و ژن درمانی در بیماریهای میتوکندریایی

مقاله درباره نگرشهای مولکولی و فیزیولوژیکی به تحمل خشکسالی

اختصاصی از رزفایل مقاله درباره نگرشهای مولکولی و فیزیولوژیکی به تحمل خشکسالی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله درباره نگرشهای مولکولی و فیزیولوژیکی به تحمل خشکسالی


مقاله درباره نگرشهای مولکولی و فیزیولوژیکی   به تحمل خشکسالی

لینک پرداخت و دانلود در "پایین مطلب"

 فرمت فایل: word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

 تعداد صفحات:24

نگرش های مولکولی و فیزیولوژیکی به تحمل خشکسالی

آب عامل اصلی محدود کننده در کشاورزی جهان می باشد. در کل اغلب گیاهان زراعی، حتی به یک تنش ملایم از دست دادن آب نیز به دشت حساس هستند. با وجود این، چند جنس از گیاهان مختص آفریقای جنوبی وجود دارند که قابلیت بسیار بالا برای مقاومت در برابر از دست دادن آب و خشک شدن را دارند. به این جنس ها، گیاهان قیامت "resurrection Plants" گفته می شود.

ما از Xerophta viscose به عنوان نمونه گیاهان قیامت (تک لپه ای) استفاده کردیم تا ژن های مرتبط با تحمل فشار اسمزی را استخراج کنیم. چندین ژن که بصورت متمایز بیان می شوند، در سطوح بیوشیمایی و ملکولی مورد مطالعه قرار گرفتند. این ژنها همان هایی هستند که قابلیت عملکردی خوبی به اشریشیاکلی در شرایط تنش اسمزی می دهند. ما در این مقاله از این آزمایش به عنوان پایه ای برای بحث درباره نگرش های ملکولی و فیزیولوژیکی به تحل خشکسالی، استفاده خواهیم کرد.

(osmoprotectants)، آبسیزیک اسید (ABA) و عوامل رونویسی

مقدمه:

آب یک جزء مهم و اساسی در متابولیسم تمام ارگانیسم های رانده است. آب، انجام شدن بسیاری از واکنش های حیاتی زیست شناختی را بوسیله دارا بودن خصوصیاتی نظیر حلالیت، فراهم کردن محیط انتقال، سرد کردن محیط از راه تبخیر، تسهیل می کند. (Bohert et al., 1995).

در گیاهان و سایر فتواتوتروف ها، آب نقش مهمی در فراهم کردن انرژی مورد نیاز برای پیشبرد فتوسنتز دارد. ملکولهای آب، طی فرآیندی بنام اتولیز شکسته شده و الکترونهایی بر جای می گذارند که این الکترونها برای به چرخه درآوردن انرژی نوری ذخیره شده در فتوسیستم II ضروری می باشند. (Salisbury an Ross, 1992a)

یکی از پیامدهای مهم تنش خشکی، از دست دادن آب پروتوپلاسمی است که منجر به افزایش غلظت یونهایی مانند  می شود. در غلظت های بالا چنین یونهایی به طور موثری مانع عملکرد متابولیکی می شوند (Hartung et al., 1998). همچنین افزایش غلظت اجزای تشکیل دهنده پروتوپلاسم و از دست دادن آب سلول باعث ایجاد وضعیت خاصی به نام «حالت شیشه ای: glassy state» می شود. در این حالت، ویسکوزیته مایع موجود در داخل سلول بیشتر می شود که در نتیجه باعث افزایش احتمال برهم کنش های مولکولی و واسرشت شدن پروتئین ها و فیوژن غشا می شوند. (Hartung et la., 1998; Hoekstra et al., 2001).

بنابراین گیاه برای حفظ تورگور سلولی و عملکردهای متابولیکی نیاز به بیان ژنهای خاصی دارد. گروه تحقیقاتی ما می کوشد گیاهان تراژنی زراعی و همچنین وحشی را که قادر به مقاوت در برابر خشکی باشند، ایجاد کند. منبع ژنها گیاهی به نام Xerophyta viscose (Baker) از خانواده Vello=iaceae است که متعلق به گروه کوچکی از نهاندانگان می باشد. این گیاه به علت قابلیت فوق العاده تحمل خشکی به «گیاه قیامت» ملقب شده است (Farrant, 2000, Gaff, 1977).

این گیاه (X. viscose) تا 5 درصد محتوای آب نسبی (RWC) می تواند آب از دست دهد و آبیاری مجدد این گیاه تقریباً به مدت 80 ساعت آنرا سیراب کرده و گیاه فعالیت های یزیولوژیکی خود را از سر می گیرد. (Sherwin and Farront, 1998).

ژنهایی که در این مقاله مورد بررسی قرار خواهند گرفت، شامل موارد زیر هستند: (XVPer 1 (کد کننده یک آنتی اکسیدان)، VATP1XV (کد کننده یک پروتئین زیر واحدی C مانند از آنزیم –H+ آدنوزین تری فسفاتاز)، XVGOLS (کد کننده یک گالاکتینول سنتاز)، ALDRXV4 (کد کننده یک آلدوز ردوکتاز)، XVSAP1 (کد کننده یک پروتئین متصل شونده به غشای سلولی) و DREB1A (کد کننده یک عامل رونویسی). برای تعیین اثرات ناشی از بیان این ژنها در تک لپه ای ها، آنها را به گیاه علفی بنام Digitaria sanguinalis انتقال دادیم و برای انتقال این ژنها خودمان یک سیستم انتقال طراحی کرده ایم (chen et al., 1998). سپس اگر نتایج مثبت باشند، ژنها به محصولات زراعی مانند ذرت (Zea mays) نیز منتقل خواهند شد. برای انجام چنین کاری بر روی دو لپه ای ها، ما نخست آن ژن ها را به Arabidopsis thaliana و Nicotina tobacum منتقل می کنیم.

پدیده تحمل خشکی یک پدیده پیچیده است که شامل بیان سازمان یافته ژنهای زیادی است (Walters et la., 2002) به عبارت دیگر، برای بدست آوردن گیاهان مقاوم در برابر خشکی، چند ژن باید به طور همزمان بیان شوند (Co-expression).


دانلود با لینک مستقیم


مقاله درباره نگرشهای مولکولی و فیزیولوژیکی به تحمل خشکسالی

دانلود تحقیق درمورد بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها

اختصاصی از رزفایل دانلود تحقیق درمورد بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

دانلود تحقیق درمورد بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها


دانلود تحقیق درمورد بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها

فرمت فایل:  ورد ( قابلیت ویرایش ) 


قسمتی از محتوی متن ...

 

تعداد صفحات : 27 صفحه

بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها . لئونارد ام.
المان، یاول دبلیو، کی، روتمود، سام روئیس، اریک وینفری. آزمایشگاه برای علم مولکولی . دانشگاه کالیفرنیای جنوبی و . بخش علم کامپیوتری . دانشگاه کالیفرنیای جنوبی . محاسبه و انتخاب سیستمهای عصبی . موسسه تکنولوژی کالیفرنیا . اخیراً، بونه، دال ووس ولیپتون، استفاده اصلی از محاسبه مولکولی را در جمله به استاندارد رمزگذاری (داده‌ها) در اتحاد متحده توضیح دادند (DES).
در اینجا، ما یک توضیح از چنین حمله‌ای را با استفاده از مدل استیگر برای محاسبه مولکولی ایجاد نموده ایم.
تجربه‌ ما پیشنهاد می‌کند که چنین حمله‌ای ممکن است با دستگاه table-top ایجاد شود که بصورت تقریبی از یک گرم PNA استفاده می‌کند و ممکن است که حتی در حضور تعداد زیادی از اشتباهها موفق شود: مقدمه :. با کار آنها در زمینه DES بته، رانودرس ولیبتون [Bor]، اولین نمونه از یک مشکل علمی را ایجاد نمودند که ممکن بود برای محاسبه مولکولی آسیب‌پذیر باشد.
DES یکی از سیستمهای Cryptographic می باشد که به صورت گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرد آن یک متن رمزی 64 بیتی را از یک متن ساده 46 بیتی و تحت کنترل یک کلید 56 بیتی ایجاد می‌نماید. در حالیکه این بحث وجود دارد که هدف خاص سخت‌افزار الکترونیکی [Wi] یا سویر کامیپوترهای همسان بصورت گسترده، این امری می‌باشد که DES را به یک میزان زمانی منطقی بشکند، اما به نظر می‌رسد که دستگاههای متوالی قدرتمند امروزی قادر به انجام چنین کاری نیستند.
ما کار را با بوته ان ال دنبال کردیم که مشکل شکست DES را موردتوجه قرار داده بود و اخیراً مدل قویتری را برای محاسبه مولکولی پیشنهاد داده بود [Ro].
در حالیکه نتایج ما امید بخش بود، اما باید بر این امر تأکیدی نمودیم که آسانی این امر نیز باید سرانجام در آزمایشگاه تصمیم گرفته شود. در این مقاله، به اصطلاح ما محله متن ساده- متن رمزدار مورد توجه قرار می‌گیرد و امید این است که کلیدی که برای عملکرد encryption (رمزدار کردن) مورد استفاده قرار می‌گیرد، مشخص شود.
ساده‌ترین نظریه برای این امر، تلاش بر روی تمام کلیدهای 256 می‌باشد که رمزسازی را برای یک متن ساده تحت هر یک از این کلیدها انجام دهیم تا متن رمزدار را پیدا نمائیم.
به طور مشخص، حملات کار امر مشخص نمی باشد و در نتیجه یک نیروی کامل برای انجام آن در اینجا لازم است. ما، کار خود را با توضیح الگوریتم آغاز کردیم تا حمله متن رمزدار- متن ساده را به منظور شکستن DES در یک سطح منطقی بکار بریم.
این به ما اجازه می‌دهد تا عملکردهای اصلی را که برای اجرا در یک دستگاه استیکر (Sticker) نیاز داریم و بعنوان یک نقشه مسیر برای آنچه که باید دنبال کنیم عمل می‌کنند تشخیص دهیم. (2) الگوریتم مولکولی : بصورت تقریبی، بار رشته‌های حافظه‌ای DNA همان یکسان 256 [Ro] شروع کنید که هر یک دارای طول نئوکلیتد 11580 می‌باشد.
ما فکر می‌کنیم که هر رشته حافظه دارای 5792 قطر پشت سر هم باشد (به مناطق [Ro] برگردید) B0,B1,B2,…B578 هر یک طول به میزان 20 نئوکلتید دارد.
در یک مدل استیکر که اینجا وجود ادر 579 استیکر وجود ارد S0, S1, …S578 که هر یک برای تکمیل هر قطعه می‌باشد (ما به رشته‌های حافظه با استیکرهای S بعنوان پیچیدگیهای حا

متن بالا فقط تکه هایی از متن به صورت نمونه در این صفحه درج شده است.شما بعد از پرداخت آنلاین فایل را فورا دانلود نمایید

بعد از پرداخت ، لینک دانلود را دریافت می کنید و ۱ لینک هم برای ایمیل شما به صورت اتوماتیک ارسال خواهد شد.


دانلود با لینک مستقیم


دانلود تحقیق درمورد بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها

تحقیق درمورد اثر وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم

اختصاصی از رزفایل تحقیق درمورد اثر وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

تحقیق درمورد اثر وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم


تحقیق درمورد اثر  وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم

 

فرمت فایل:  ورد ( قابلیت ویرایش ) 

 


 
قسمتی از محتوی متن ...

 

تعداد صفحات : 12 صفحه

به نام خدا Effects of molecular weight and deacetylation degree of chitin / chitosan on wound healing. اثر وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم خلاصه : در این مقاله اثر کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم ها و برش های خطی در موش ها بررسی شده است .
تحکام شکاف زخم در گروههای کیتوسان (cos),D-glucosamine (GLcNAc)] N-acetyl –D-glucosamine و Chiti – aligosaccharide (NACOS) و کیتین ) بیشتر بود .
فعالیت آنزیم های کلاژناز هم در گروه های کیتوسان بیشتر از گروههای کتین است .
میزان تغییرات در مورد تجمع و استحکام و فعالیت آنزیم های کلاژ ناز در نمونه های مختلف زیاد نبود.
دریافته های بافت شناسی رشته های کلاژن به صورت عمود بر خط برش در گروه های (NACOS,COS) رشد کردند و در گروههای کیتوسان تعدادی فیبروبلاست فعال شده در اطراف زخم دیده شد.
در DD های بالا استحکام خط برش ترمیم یافته بیشتر است مچنین سمیزان فیبروبلاست های ظاهر شده اطراف زخم .
مقدمه : کیتین و کیتوسان تعدادی خواص بیولوژیکی مفید در کاربرد هایی نظیر : 1- پوشش زخم ها 2- زیست سازگاری بالا 3-قابلیت زیست ستخریب پذیری 4- عامل انعقاد خون 5- عامل ضد عفونت 6- عامل تسریع در ترمیم زخم در این تحقیق روی اثر کیتین و کیتوسان روی ترمیم زخم کار شده و بهایننتیجه رسیده که این موارد ست های ترمیم و سلول های (PMN) Polymorphonuclear و فیبروبلاست ها و سلول های اندوتلیال رگ ها را فعال می کنند .
وقتی کیتین و کیتوسان در بدن استفاده می شوند توسط آنزیم های کیتیناز و کیتوساناز خریب می شوند و متعاقباٌ به متومر و الیگومر هایشان تبدیلمی شوند . در تحقیقات گذشته ثابت شده که نه تنها کیتین و کیتوسان بلکه ایگومرها و منومرهای آنها نیز روی مهاجرت سلول های ساندوتلیان و فیبروبلاست ها اثر دارد و منومرها و الیگومرهای آنهابر روی ترمیم زخم ها در محیط in-vivo موثرند .
هر چند که رابطة بین خواص شیمیایی و کیتین و کیتوسان و ترمیم زخم هستند شناخته نشده است .
در تحقیق حاضر کیتین و کیتوسان با وزن های مولکولی مختلف و DD های مختلف آماده شده اند و اثر آنهاروی ترمیم زخم های برشی ایجاد شده در موشها آزمایش شده .
و همچنین استحکام زخم ترمیم شده و میزان آنزیم کلاژناز در بافت هم اندازه گیری شده که این دو عنوان شاخص برای ترمیم زخم هستند .
آزمایشات : در این تحقیق تین و کیتوسان توسط شرکت Sunfive + ژاپن ساخته شه است کیتین ( باوزن مولکولی 300KD ) و کیتوسان ( با وزن مولکولی 80KD ) ا میانگین سایز 5/3 میکرو متر بوسیله اکسید اتیلن استریل شدند و در محلول بافر فسفات ( PBS با PH=7/2 ) با غلظت 10 میلی گرم بر میلی لیتر معلق می شوند .
کیتین و کیتوسان به ترتیب شامل DD های کمتر از 10 درصد و بیشتر از 80 درصد هستند .
NACOS و COS به ترتیب از ترکیب [GLcNAcNAc5] و [GLCN1, GLCN6] بدست آمده اند .
الیگومرها و منومرها در محلول PBS با غلظت 10 میلی گرم بر میلی لیتر حلشدند و از فیلترهای با روزنه های 45/0 میکرو متر عبور کرده و استریل شدند .
هر نموه با غلظت 1/0 تا 10 میلی گرم بر میلی لیتر با PBS تنظیم شد.
چهار نمونه مختلف deacetylation شده کیتین (dac) ( با 14% و 23% و 63%

متن بالا فقط تکه هایی از متن به صورت نمونه در این صفحه درج شده است.شما بعد از پرداخت آنلاین فایل را فورا دانلود نمایید

بعد از پرداخت ، لینک دانلود را دریافت می کنید و ۱ لینک هم برای ایمیل شما به صورت اتوماتیک ارسال خواهد شد.


دانلود با لینک مستقیم


تحقیق درمورد اثر وزن مولکولی و DD کیتین و کیتوسان روی فرآیند ترمیم زخم

دانلود تحقیق بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها

اختصاصی از رزفایل دانلود تحقیق بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

دانلود تحقیق بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها


دانلود تحقیق بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها

دسته بندی : پزشکی،

نوع فایل:  ورد ( قابلیت ویرایش و آماده چاپ

 


 قسمتی از محتوای متن ...

تعداد صفحات : 27 صفحه

بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها .
لئونارد ام.
المان، یاول دبلیو، کی، روتمود، سام روئیس، اریک وینفری.
آزمایشگاه برای علم مولکولی .
دانشگاه کالیفرنیای جنوبی و .
بخش علم کامپیوتری .
دانشگاه کالیفرنیای جنوبی .
محاسبه و انتخاب سیستمهای عصبی .
موسسه تکنولوژی کالیفرنیا .
اخیراً، بونه، دال ووس ولیپتون، استفاده اصلی از محاسبه مولکولی را در جمله به استاندارد رمزگذاری (داده‌ها) در اتحاد متحده توضیح دادند (DES).
در اینجا، ما یک توضیح از چنین حمله‌ای را با استفاده از مدل استیگر برای محاسبه مولکولی ایجاد نموده ایم.
تجربه‌ ما پیشنهاد می‌کند که چنین حمله‌ای ممکن است با دستگاه table-top ایجاد شود که بصورت تقریبی از یک گرم PNA استفاده می‌کند و ممکن است که حتی در حضور تعداد زیادی از اشتباهها موفق شود: مقدمه :.
با کار آنها در زمینه DES بته، رانودرس ولیبتون [Bor]، اولین نمونه از یک مشکل علمی را ایجاد نمودند که ممکن بود برای محاسبه مولکولی آسیب‌پذیر باشد.
DES یکی از سیستمهای Cryptographic می باشد که به صورت گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرد آن یک متن رمزی 64 بیتی را از یک متن ساده 46 بیتی و تحت کنترل یک کلید 56 بیتی ایجاد می‌نماید.
در حالیکه این بحث وجود دارد که هدف خاص سخت‌افزار الکترونیکی [Wi] یا سویر کامیپوترهای همسان بصورت گسترده، این امری می‌باشد که DES را به یک میزان زمانی منطقی بشکند، اما به نظر می‌رسد که دستگاههای متوالی قدرتمند امروزی قادر به انجام چنین کاری نیستند.
ما کار را با بوته ان ال دنبال کردیم که مشکل شکست DES را موردتوجه قرار داده بود و اخیراً مدل قویتری را برای محاسبه مولکولی پیشنهاد داده بود [Ro].
در حالیکه نتایج ما امید بخش بود، اما باید بر این امر تأکیدی نمودیم که آسانی این امر نیز باید سرانجام در آزمایشگاه تصمیم گرفته شود.
در این مقاله، به اصطلاح ما محله متن ساده- متن رمزدار مورد توجه قرار می‌گیرد و امید این است که کلیدی که برای عملکرد encryption (رمزدار کردن) مورد استف

  متن بالا فقط تکه هایی از متن به صورت نمونه در این صفحه درج شده است.شما بعد از پرداخت آنلاین فایل را فورا دانلود نمایید

بعد از پرداخت ، لینک دانلود را دریافت می کنید و ۱ لینک هم برای ایمیل شما به صورت اتوماتیک ارسال خواهد شد.

( برای پیگیری مراحل پشتیبانی حتما ایمیل یا شماره خود را به صورت صحیح وارد نمایید )

«پشتیبانی فایل به شما این امکان را فراهم میکند تا فایل خود را با خیال راحت و آسوده دریافت نمایید »


دانلود با لینک مستقیم


دانلود تحقیق بکارگیری محاسبه مولکولی با استاندارد رمزگذاری داده‌ها