کارافرینی کاربرد سلول های بنیادی

اختصاصی از رزفایل کارافرینی کاربرد سلول های بنیادی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک پرداخت و دانلود *پایین مطلب*

 

فرمت فایل:Word (قابل ویرایش و آماده پرینت)

 

تعداد صفحه:37

فهرست و توضیحات:

کاربرد سلول های بنیادی

سلول‌های بنیادی

کاربردهای سلول‌های بنیادی

بیماران قلبی

• بیماران کبدی:

 استفاده سلول های بنیادی در cloning

دستکاری ژنتیکی سلول های ES 1

استفاده شده است در زیر بیان می شوند.

عملکرد ژن : بهترین استفاده gene targeting در سلول های ES مطالعه عملکرد زنها توسط ایجاد موش های دارای نقص در ژن مورد نظر- موشهای knock out- می باشد. برای ایجاد یک ژن ناک اوت شده تمام یا بخشی از منطقه ژن با یک ژن گزارشگر جایگزین می شود اگر ژن گزارشگر تحت کنترل ژن موردنظر قرار بگیرد این ژن knock in نامیده می شود و اطلاعات بیشتری در مورد عملکرد زن توسط توانایی مطالعه بیان ژن و رد یابی سلول های هدف قرار گرفته بدست آورد. در سال های اخیر تکنیک ناک اوت ژن ها آنقدر پیشرفت کرده که می توان حیوانات ناک اوت شده شرطی و خاص بافتی ایجاد کرد . این روش به خصوص هنگامی مفید است که ناک اوت یک ژن معمول باعث مرگ زود هنگام یا فنوتیپ غیر طبیعی شده و باعث می شود تا نتوان عملکرد ژن را در یک بافت خاص دنبال کرد. ناک اوت های خاص بافتی و پیکری امکان استفاده از سیستم های نوترکیبی جایگاه خاص- اغلب سیستم cre/loxp – را فراهم کرده است. جایگاههای Lox P توسط نوترکیبی همولوگ در دو طرف بخش کد کننده از زن انتخاب شده قرار می گیرند. در این شرایط ژن هنوز فعال است تا زمانی که Lox P با هیچ عنصر تنظیمی تداخل پیدا نکرده است . موش ها از چنین سلول های ES تهیه می شوند و می توانند با موشهایی که در انها ریکامبیناز cre بیان می شود کراس یابند. پس از بیان cre نوترکیبی بین دو جایگاه Lox P انجام می شود و باعث می شود که بخش کد کننده حذف شده و عملکرد ژن از درست برود . در مورد نام
 اوت های خاص بافتی cre تحت کنترل یک پروموتر خاص بافتی قرار می گیرد و بنابر این ژن هدف قرار کرفه شده فقط در بافت مورد نظر ناک اوت می شود. برای ایجاد یک ناک اوت پیکری ، از cre تغییر یافته ای استفاده می شود که در یک حالت قابل القاء فعال می شود. مثلا cre با TBD فیوز می شود و در این صورت ،cre فقط در حضور tamoxifen فعال می شود. با هدف قرار دادن یک cre قابل القا تحت کنترل یک پروموتر خاص بافتی می توان ناک اوت بافتی و بدنی ایجاد کرد . ناک اوت های قابل باز فعال شدن را نیز می توان ایجاد کرد که در انها یک توالی خاتمه دهنده که در کنار جایگاه LoxP قرار گرفته در بالادست منطقه کد کننده زن قرار می گیرد و مامع بیان ژن می گردد. تحت شرایط نوترکیبی به واسطه cre توالی خاتمه خارج شده و بیان ژن دوباره فعال می گردد. مدل سازی بیماری ها: توانایی ایجاد جهش های جایگاه خاص و ناک اوت کامل ژنها توسط gene targeting منجر به تولید موشهای مدل برای انواع بیماری ها از جمله بیماریهای عصبی و متابولیک و خونی شده است. یک مثال مربوط به آلزایمر می باشد که حداقل بر اثر جهش در 4 ژن ایجاد می شود . افزایش دز ژن و جهش در پروتئین پیش ساز بتا آمیلوئید (APP) با آلزایمر در ارتباط بوده جهش در زن آپولیپوپروتئین E نیز با ریسک افزایش یافته و کاهش سن شروع بیماری در ارتباط است. امروزه توسط gene targeting در سلول هایES مدل های موشی ایجاد
 شده اند که حاوی یک جهش نقطه ای در ژن APP و یا ژن ApoE ناک اوت شده
می باشند. به کمک BAC و یستم های نوترکیبی جایگاه خاص مثل cre/Lox P
مدل هایی برای جابه جایی های کروموزومی برای سرطانهای خاص ایجاد کرده اند.
رد یابی دودمانها :همانطور که ذکر شد یک استفاده تکنولوزیgene targetiung قرار دادن یک ژن گزارشگر تحت کنترل یک پروموتر اندوژن برای مطالعه الگوی بیان ان ژن می باشد(knock in) . به کمک این تکنیک امکان رد یابی دودمانها یا انجام fate mapping توسط دستکاری ژنتیکی را فراهم آورده است . در این سیستم یک ریکامبیناز جایگاه خاص مثل cre تحت کنترل پروموتر خاصی در دودمان یا cell type خاصی قرار می گیرد. موشهای تهیه شده توسط این سلول های ES می توانند با موش های دارای یک ژن گزارشگر همراه با یک توالی خاتمه کراس داده شوند. بیان cre در سلول های خاص دودمان که بر اثر نوترکیبی بین جایگاههای LoxP ، برداشت توالی خاتمه و بیان ژن گزارشگر می باشد ، انجام می گیرد . بنابر این تمام اولاد
سلول های اولیه بیان کننده cre با ژن گزارشگر نشاندار می شوند . بدین ترتیب
 می توان سرنوشت اخلاف سلول های مختلف را طی تکوین دنبال نمود